30/7/14

Identificación de MET10-932, Saccharomyces cerevisiae,

Identificación de MET10-932 y caracterización como hidrógeno formación de sulfuro de alelo reductor en vino de las cepas de Saccharomyces cerevisiae.

Abstracto

Un aislado de viña de la levadura Saccharomyces cerevisiae, UCD932, se identificó como una cepa que produce poco o nada de sulfuro de hidrógeno detectable durante la fermentación del vino. El análisis genético reveló que este rasgo segregado como un único determinante genético. El gen también confiere un fenotipo blanco colonia en BiGGY de agar (agar de bismuto-glucosa-glicina-levadura), que se cree que indican bajos niveles basales de actividad de la reductasa de sulfito. Sin embargo, este aislamiento no muestra un requisito para los aminoácidos que contienen S, lo que indica que la vía de la reducción de sulfato es totalmente operativo. Cruces genéticos contra mutaciones conocidas que confieren color de la colonia blanca en BiGGY de agar identificaron el gen que conduce a la reducción de H (2) la formación de S como un alelo de MET10 (MET10-932), que codifica una subunidad catalítica de sulfito reductasa. El análisis de secuencia de MET10-932 reveló varias diferencias de aminoácidos correspondientes en relación con laboratorio cepa S288C. También se detectaron diferencias alélicas para otros genes de la vía de la reducción de sulfato en UCD932. El alelo MET10 de UCD932 se encontró que era única en comparación con las secuencias de varios otros viñedo aísla con diferentes niveles de producción de H (2) S. Sustitución del alelo MET10 de alta-H (2) S cepas productoras con MET10-932 evitado H (2) S formación por esas cepas. Un solo cambio mutativo, correspondiente a T662K, en MET10-932 dio lugar a una pérdida de H (2) la producción de S. El papel de sitio 662 en la reducción de sulfuro se analizó adicionalmente cambiando el aminoácido codificado en esta posición. Un cambio de nuevo a treonina o serina a la conservadora restauró completamente el H (2) la formación de S conferido por este alelo. Además de T662K, arginina, triptófano, ácido glutámico y sustituciones redujeron de forma similar la formación de sulfuro.

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